应用Western Blotting的方法检测血清中某种蛋白的含量是,最关键的问题是要将血清做怎样的电泳前处理.

一般的处理方式:

1.     常规分离血清,即取血后常温放置,使其凝固,然后3000 rpm 15 min离心,取上清即可。

2.     测血清蛋白浓度。

3.     用Laemmli buffer（蛋白裂解液）稀释至所需浓度，我一般为5ug/ul.

4.     加入适量loading buffer，100℃煮5分钟。注意：有时会出现水煮后，蛋白液变得非常粘稠，这时可以在65℃煮10-20 minutes以替代沸水煮。

PS：对于目标蛋白在血清中含量很低，或者目标蛋白分子量与白蛋白或球蛋白分子量相近的情况下，必烦要去除血清中的白蛋白和/或球蛋白，以下是知名厂商G-Biosciences提供的试剂盒，使用较为简便，同时价格也不贵哦。

美国G-Biosciences-AlbuminOUT?白蛋白去除试剂盒

血浆和脑脊髓液等样本中，包含大量的白蛋白，从而封闭掉在二维凝胶电泳中发现和鉴定其他低丰度蛋白的可能。AlbuminOUT?白蛋白去除试剂盒被设计用来在这种样本中大量去除白蛋白。

这种白蛋白去除方法是基于白蛋白和Cibachron蓝色染料的结合。AlbuminOUT?被优化从样本中去除人的白蛋白。AlbuminOUT?使用快速离心柱方法，每个柱子含有0.2ml的染料结合树脂，从而可以结合大于2mg的人白蛋白。AlbuminOUT?可以从5-50微升人血浆中去除大于98%的白蛋白。

离心柱形式可以在10分钟内去除白蛋白。高结合力的蓝色染料结合树脂可以从人，猪，羊，狗，兔，大鼠和牛样本中达到瞬间的结合和去除白蛋白。AlbuminOUT?或许也可以从其他物种中去除白蛋白。适用于处理25或50个样本。

Figure 1:  2D  analysis  of  whole  human  serum  before  (left)  and  after

(right) treatment with AlbminOUT^?.

产品特点：

l 从样本中不到10分钟的时间内去除白蛋白

l 基于白蛋白和Cibachron蓝色染料的结合

l 每个柱子的结合力大于2mg的人白蛋白

l 从5-50微升人血浆中去除大于98%的白蛋白

应用：

从生物学样本比如血浆和脑脊髓液中去除白蛋白

产品信息：